斑节对虾CDK2基因全长cDNA克隆及表达分析

• 作者: 傅明骏 史进选 周发林 戴文婷 杨其彬 王艳 赵超 邱丽华
• 来源期刊: 南方水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 斑节对虾 CDK2 实时荧光定量PCR 原核表达 卵巢发育
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 页码范围: 1-11
• 页数: 11页
• 分类号: S917
• 字数: 8833字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2015.02.001

摘要

该研究以斑节对虾（ Penaeus monodon）cDNA文库中的CDK2片段为基础，利用RACE技术获得PmCDK2的cDNA全长，并利用生物信息学对其进行了分析。PmCDK2基因全长1679 bp，包括编码306个氨基酸的921 bp的开放阅读框（ ORF），258 bp的5＇UTR和500 bp的3＇UTR。同源性分析显示，PmCDK2与罗氏沼虾（ Macrobrachi-um rosenbergii）等物种的CDK2具有较高的同源性。使用荧光定量PCR技术研究了PmCDK2的mRNA在不同组织和卵巢发育各时期的相对表达量和变化模式，结果显示，PmCDK2在斑节对虾的脑、心、淋巴、肝胰腺、性腺等组织中均有表达，其中精巢中表达量显著高于其他组织；卵巢发育阶段表达分析则显示PmCDK2在Ⅲ期表达量最高，其次是Ⅳ期。通过原核表达技术成功获得了含有6个His标签的融合蛋白，并对融合蛋白进行 Western Blot试验，初步探讨了重组蛋白表达情况。结果表明，PmCDK2基因在斑节对虾卵巢发育过程中可能发挥了重要作用，该结果对进一步探究斑节对虾卵巢发育机理提供了一定的理论依据。