哈茨木霉LTR-2双价基因重组菌株的构建及其防治效果

• 作者: 张广志 李纪顺 杨合同 王贻莲 郭凯 陈凯
• 来源期刊: 中国生物防治学报
• 学科: 农学
• 关键词: 哈茨木霉LTR-2 β-1,4-葡聚糖酶基因 几丁质酶基因 REMI 防治效果
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 346-352
• 分类号: S476
• 语种: 中文
• DOI: 10.16409/j.cnki.2095-039x.2015.03.009

摘要

本文利用限制性内切酶介导法转化哈茨木霉LTR-2,获得具有双价基因(glu14、chi42)的重组生防菌株.试验得到的木霉转化子具有遗传稳定性,于无药PDA平板上连续转接6次后,在Hyg 200 μg/mL的PDA平板上仍可继续生长.PCR扩增及Southern杂交证实目的基因已随机插入木霉基因组DNA上,本试验转化子均为单拷贝插入.转化子的β-1,4-葡聚糖酶和几丁质酶水解活性较出发菌株LTR-2显著提高(P＜0.01),其中转化子L-15的两种水解酶活性均最高.转化子在温室条件下对番茄晚疫病、茄子猝倒病和黄瓜灰霉病均有较好的防治作用,但不同处理间存在显著性差异(P＜0.01),其中转化子L-15最高,对3种病害的防治效果分别达到了91.5％、94.9％和83.8％,较出发菌株LTR-2处理分别提高了53.5％、55.9％和33.5％.结果表明,利用REMI技术,将β-1,4-葡聚糖酶基因glu14和几丁质酶基因chi42重组到木霉染色体DNA上,是获得高效重组菌株的有效手段.