靶向乳腺癌膜相关抗原HAb18G/CD147双模态单光子发射计算机断层成像-MRI探针的构建与表征

• 作者: 乔瑞瑞 刘先平 印弘 康晓伟 张明如 李国权 李郁 梦遥 汪静 蒋建利 高明远 魏光全
• 来源期刊: 中华放射学杂志
• 关键词: 乳腺肿瘤 磁共振成像 分子影像学
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 乳腺放射学
• 页码范围: 500-506
• 页数: 7页
• 字数: 6217字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1005-1201.2015.07.006

摘要

目的：探讨靶向乳腺癌膜相关抗原HAb18G/CD147双模态单光子发射计算机断层成像（SPECT）?MRI显像探针的构建方法，并研究其理化性质及体外生物特性。方法将超顺磁性氧化铁（SPIO）纳米颗粒与HAb18G/CD147的抗体片段HAb18F（ab'）2通过化学偶联法共价结合，得到复合物SPIO?HAb18F（ab'）2，采用Iodogen法对复合物进行125I标记，制得双模态靶向探针125I?SPIO?HAb18F （ab'）2。采用SPIO及125I?HAb18F（ab'）2作对照。对分子探针进行表征，包括记录纳米粒子形态、大小、水合粒径；测定SPIO和125I?SPIO?HAb18F（ab'）2溶液的T2横向弛豫率；测量125I?SPIO?HAb18F（ab'）2及125I?HAb18F（ab'）2的放射化学纯度及脂水分配系数；分析不同Fe2+浓度（1、5、10、20、40μg/ml）的125I?SPIO?HAb18F（ab'）2溶液对乳腺癌细胞系MDA?MB?231（实验组）及MDA?MB?468（对照组）存活率的影响。然后行靶向探针125I?SPIO?HAb18F（ab'）2的体外细胞结合实验，分别行MRI检查和SPECT检查。对与靶向探针125I?SPIO?HAb18F（ab'）2共同体外培养后的实验组、对照组及未作处理的MDA?MB?231细胞悬液（空白组）行MRI检查，测量其信号强度，计算MRI信号变化率。将实验组及对照组细胞悬液，在不同时间（20 min、40 min、1 h、2 h、4 h）经过处理，用γ计数仪测量每管放射性计数，分别计算其细胞结合率。采用单因素方差分析比较不同Fe2+浓度的125I?SPIO?HAb18F（ab'）2溶液对各组细胞增殖的抑制作用及SI值的差异。结果靶向乳腺癌膜相关抗原HAb18G/CD147的双模态SPECT?MRI探针构建成功。SPIO纳米颗粒核心粒径为（10.32±1.30）nm，SPIO及125I?SPIO?HAb18F（ab'）2水合粒径分别为44.80、52.64 nm。SPIO和125I?SPIO?HAb18F（ab'）2溶液的T2横向弛豫率分别为38.79、106.73 mM－1·s－1。125I?SPIO?HAb18F（ab'）2溶液和对照组125I?HAb18F（ab'）2溶液的标记率分别为41.90%和85.50%，二者的放射化学纯度均>95%，在PBS及鼠血清中均具有较好的稳定性。125I?SPIO?HAb18F（ab'）2与125I?HAb18F（ab'）2的脂水分配系数分别为－0.99±0.03和－1.49±0.08，表明二者均为水溶性物质。不同铁浓度（1、5、10、20、40μg/ml）的125I?SPIO?HAb18F（ab'）2与MDA?MB?231和MDA?MB?468细胞孵育72 h后吸光度值差异无统计学意义（F值分别为0.78、0.66，P值分别为0.58、0.66）。体外细胞结合实验：（1）MRI：实验组、对照组及未作处理组的SI值分别为1670±5、1930±8、2349±14，差异有统计学意义（F=4408.48，P=0.000）。实验组平均信号强度变化率为28.87%，对照组为17.78%。（2）SPECT：MDA?MB?231细胞可特异性摄取125I?SPIO?HAb18F（ab'）2，20 min时其结合率为（6.52±0.60）%，4 h时为（10.52±2.04）%。结论靶向乳腺癌膜相关抗原HAb18G/CD147的特异性双模态SPECT?MRI探针125I?SPIO?HAb18F（ab'）2制备成功，该探针具有良好的理化性质和体外生物特性。