大豆蚜内共生菌groEL克隆及表达水平分析

• 作者: 徐忠新 王红 赵奎军 韩岚岚
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆蚜 大豆花叶病毒 内共生菌 病毒结合蛋白基因 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 964-971
• 分类号: S565.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2015.06.0964

摘要

为了解大豆蚜(Aphis glycines Matsumura)传播的大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)与其体内共生菌产生的病毒结合蛋白(GroEL)之间的作用机制,运用RT-PCR技术克隆得到大豆蚜内共生菌groEL基因全序列,把该基因与pET21b载体重组后进行原核表达,经Ni-Agarose His亲和层析得到纯化的蛋白,并利用荧光定量PCR技术分析了饲毒不同时间、不同龄期大豆蚜内共生菌groEL基因表达量的变化.序列分析表明:大豆蚜内共生菌groEL基因全长序列为1 647 bp,编码548个氨基酸,推测蛋白分子量和pI值分别为69 kDa和5.24,成功构建重组载体pET21b-GroEL进行原核表达,Western-blot鉴定确定为目的蛋白,蛋白可溶性分析发现重组蛋白为包涵体.随饲食SMV时间的延长大豆蚜内共生菌groEL的表达量显著增加,且无翅成虫与有翅成虫内共生菌groEL的表达量显著高于其它4个若虫期.大豆蚜内共生菌groEL基因能在原核细胞中稳定、正确表达,并且大豆蚜在饲食SMV后会诱导其内共生菌groEL的表达,从而增加SMV爆发流行的可能性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩岚岚	东北农业大学农学院	54	318	12.0	14.0
2	赵奎军	东北农业大学农学院	134	1308	19.0	28.0
3	王红	东北农业大学农学院	24	127	7.0	10.0
4	徐忠新	东北农业大学农学院	6	46	3.0	6.0