人Pokemon蛋白锌指结构域的表达与纯化

• 作者: 刘莉 张萌萌 徐志卿 李岳亭 杨予涛
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: Pokemon 锌指结构域 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 222-227
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.02.033

摘要

旨在原核表达Pokemon基因的锌指结构域，纯化获得GST-Zinc finger的融合蛋白。以人胶质瘤T98G细胞的cDNA为模板，利用PCR扩增带有BamH I和Sal I酶切位点的人Pokemon基因的锌指结构域，然后将其克隆到pGEX-4T-1原核表达载体中。将正确的重组载体转入大肠杆菌BL21（DE3），用IPTG诱导表达，再利用MagneGST particles亲和纯化Zinc finger融合蛋白，最后通过Western blot鉴定此融合蛋白。结果显示，成功构建pGEX-4T-1-Zinc finger原核表达载体；30℃条件下，0.2 mmol/L的IPTG能诱导出大量的可溶性GST-Zinc finger蛋白；经MagneGST particles纯化的GST-Zinc finger蛋白可被识别Pokemon锌指结构域的抗体特异识别。纯化的GST-Zinc finger蛋白可用于后续的生物学研究。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘莉	首都医科大学基础医学院	36	217	9.0	13.0
2	张萌萌		10	59	3.0	7.0
3	徐志卿	首都医科大学基础医学院	29	45	4.0	6.0
4	杨予涛	首都医科大学基础医学院	17	12	2.0	3.0
5	李岳亭	首都医科大学基础医学院	2	0	0.0	0.0