大豆RNA依赖的RNA聚合酶基因GmRDR1的克隆与表达特性分析

• 作者: 吴冰月 宋普文 崔瑾 沈良 许晓明 陈华涛 陈新
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 基因克隆 组织表达 荧光定量PCR 生物胁迫 非生物胁迫 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 19-25
• 分类号: S565.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2015.01.0019

摘要

为了寻找大豆抗病新基因,培育大豆新型抗性品种,利用同源克隆的方法从大豆品种科丰1号中分离出1个新的GmRDR1基因,并对其进行序列分析,组织表达、抗逆境胁迫表达分析及该基因的亚细胞定位研究.结果表明:GmRDR1基因位于大豆基因组的第2号染色体,基因全长为3 956 bp,其中ORF为3 378 bp,编码1 125个氨基酸,相对分子量和等电点分别为279.72×103和4.63;GmRDR1含有RDRs家族的保守序列“DLDGD”;该基因在所有被检测组织中均表达,并且在叶中的表达量最高;荧光定量结果发现:在大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)处理下,GmRDR1在抗病材料科丰1号中的表达量显著高于感病材料南农1138-2.盐及干旱胁迫下,48 h之内,该基因的表达量明显升高,SA诱导条件下该基因在6h出现了早期响应,冷害处理下24 h表达量出现了突然的升高.GmRDR1基因的亚细胞定位结果表明:该基因所编码的蛋白定位在细胞核里.根据以上结果判定GmRDR1基因参与了大豆对SMV的抗性反应,并且能够强烈响应盐和干旱的胁迫,因此该基因在大豆抗逆分子育种中具有较好的应用价值.