RCCS模拟微重力对铜绿假单胞菌毒力编码基因和蛋白质谱的影响

• 作者: 周金莲 崔彦 张军 徐冰心 李成林 杨建武 段育忠 董满库 黄玉玲
• 来源期刊: 解放军医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 失重模拟 铜绿假单胞菌 基因表达 蛋白质谱
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 失重环境感染性疾病与机体损伤的研究
• 页码范围: 1-5,18
• 页数: 6页
• 分类号: R378.991|R856
• 字数: 4301字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-140X.2015.06.001

摘要

目的 探讨三维细胞培养系统( RCCS)模拟微重力环境对铜绿假单胞菌( PA)毒力编码基因表达及菌体蛋白质谱的影响. 方法 应用RCCS建立PA ATCC 27853模拟微重力培养体系,实验组旋转瓶轴心与地面平行模拟微重力环境,对照组即重力组旋转瓶轴心与地面垂直;采用实时荧光定量聚合酶链反应( Real-time PCR)检测cDNA样本中毒力编码基因外毒素(toxA)、弹性蛋白酶(lasB)、鼠李脂糖(rhlA)、绿脓菌素(phza2)mRNA的相对含量;利用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术及CM10芯片检测PA菌体蛋白质谱. 结果 RCCS模拟微重力处理14 d后,Real-time PCR检测实验组cDNA样本中toxA、lasB、rhlA、phza2 毒力编码基因相对含量均低于对照组( P<0. 05 );表面增强激光解吸电离飞行时间质谱检测发现有82种小分子菌体蛋白质[荷比在(2~20) × 103 Da范围内],两组42种菌体蛋白相对含量表达差异有统计学意义,实验组20种蛋白质相对含量表达高于对照组,22种蛋白质相对含量表达低于对照组( P<0. 05 ). 结论 RCCS模拟微重力培养条件下PA毒力编码基因表达和菌体蛋白质谱发生显著变化.