半滑舌鳎富含亮氨酸的G蛋白偶联受体基因(LGR8)的分子克隆和表达分析

• 作者: 于洋 修旺姗 刘肖峰 吴娅红 张宁 董忠典 陈松林
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 半滑舌鳎 富含亮氨酸的G蛋白偶联受体基因(LCR8) 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) 性别分化
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1188-1195
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.09.008

摘要

富含亮氨酸的G蛋白偶联受体(leucine rich repeat containing G protein coupled receptor 8,LGR8)在哺乳类动物雄性精巢下降过程中起重要作用.本研究在前期完成的半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)全基因组测序与转录组测序的基础上,通过RACE方法克隆得到半滑舌鳎LGR8基因(GenBank登录号:KP749830),该基因全长2 768 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)为2 205 bp,编码734个氨基酸,5’-非翻译区(untranslated regions,UTR)为272 bp,3’-UTR为296 bp.氨基酸序列中含有10个LRRs区域、1个LDL-A区域和1个7tm-1结构域.实时定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)结果显示,在3龄性成熟鱼体中LGR8主要在雄鱼脑和性腺中表达,且显著高于其他组织(P＜0.05);在雌鱼各组织中均有表达,但是大多数组织(除肠和心脏)中表达量无显著差异;在雄鱼性腺和脑中的表达量要显著高于雌鱼(P＜0.05).对雄鱼不同时期的性腺进行qRT-PCR检测结果显示,LGR8基因在鱼体发育80 d表达量开始上升,150～210 d表达量达到最大,且显著高于其他组织(P＜0.05).研究表明LGR8可能在半滑舌鳎性别决定和性腺发育中起一定作用,为半滑舌鳎性别决定机制的研究提供了一定的理论基础.