促红细胞生成素受体干扰RNA慢病毒表达载体的构建及干扰细胞的筛选

• 作者: 呼格吉乐
• 来源期刊: 中华危重症医学杂志（电子版）
• 关键词: 干扰RNA 促红细胞生成素受体 慢病毒 胶质瘤
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 347-350
• 页数: 4页
• 字数: 2965字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-6880.2015.06.003

摘要

目的 构建人促红细胞生成素受体(EPOR)干扰RNA慢病毒(LV)表达载体,并筛选出EPOR能稳定干扰人脑胶质细胞瘤U251细胞的最佳感染复数(MOI). 方法 构建人EPOR干扰RNA慢病毒表达载体,即LV-EPOR,收集病毒,检测病毒滴度后感染人脑胶质细胞瘤U251细胞(LV-EPOR-U251细胞),根据MOI值的不同分为MOI100、MOI10、MOI1组,选出荧光表达量最高的一组,经RT-PCR检测mRNA表达,计算干扰效率.结果 将目的序列成功连接到载体上,并经测序分析证实载体构建成功.经RT-PCR检测结果证实,MOI100组的LV-EPOR-U251细胞荧光表达量最高,其干扰效率为72％.结论 成功构建LV-EPOR,LV-EPOR-U251细胞稳定干扰的MOI值为100.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	呼格吉乐	内蒙古医科大学附属医院检验科	30	41	3.0	5.0