大豆GmbZIP71基因的克隆及EMSA分析

• 作者: 刘宝辉 刘晓兵 南海洋 孔凡江 袁晓辉
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 bZIP 原核表达 EMSA
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 32-35,41
• 分类号: S565.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2015.01.0032

摘要

通过PCR扩增的方法从大豆品种Harosoy中克隆到1个新的bZIP基因(GmbZIP71),基因表达分析表明GmbZIP71在叶片、生长点、花、花芽、荚和根等多个器官中表达.将GmbZIP71构建到原核表达载体pET29b上,导入大肠杆菌BL21 (DE3)中,对其进行IPTG诱导.结果表明:在IPTG浓度为0.25 mmol·L-1,诱导时间为4h,诱导温度为28℃时,重组蛋白得到表达,分子量大约为48 kDa,SDS-PAGE电泳结果表明重组蛋白主要以包涵体形式存在,用His蛋白纯化系统回收得到GmbZIP71-His重组蛋白,EMSA(electrophoretic mobility shift assay)实验表明GmbZIP71重组蛋白可以在体外与ACGT顺式作用元件结合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘晓兵		17	28	4.0	4.0