大豆悬浮细胞培养及作为外源基因转化受体的研究

• 作者: 孟祥勋 岳娜 方星 王建国 胡倩倩
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 悬浮细胞 硼酸 农杆菌 超声 转化
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 36-41
• 分类号: S565.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2015.01.0036

摘要

以吉林小粒7号大豆品种为材料,切取无菌幼苗下胚轴诱导愈伤组织,初步建立了大豆悬浮细胞系,测定不同硼酸浓度下悬浮细胞生长变化;采用农杆菌介导法对大豆悬浮细胞进行外源GUS基因的转化,先通过不同程度的超声处理确定最佳超声时长,然后在最佳超声处理时长的基础上,探讨了硼酸浓度对转化效率的影响;最后采用PCR和Southern blot杂交对抗性愈伤做分子鉴定.结果表明:大豆悬浮细胞正常生长硼酸浓度在2.0～10 mg·L-1,过高或过低均会抑制大豆细胞正常的生长,高于100 mg·L-1时抑制作用最显著.但在转化过程中,适当增加硼酸浓度(10 ～30 mg· L-1)则能够提高悬浮细胞的转化效率,并且有助于转化组织的筛选,借以3 min超声的辅助作用,30 mg·L-1硼酸浓度下转化效率达到1 mg转化细胞团中含28个转化体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟祥勋	苏州大学基础医学与生物科学学院	22	414	11.0	20.0
2	方星	苏州大学基础医学与生物科学学院	5	25	3.0	5.0
3	岳娜	苏州大学基础医学与生物科学学院	4	25	3.0	4.0
4	胡倩倩	苏州大学基础医学与生物科学学院	5	25	3.0	5.0
5	王建国	苏州大学基础医学与生物科学学院	2	5	2.0	2.0