美国白蛾几丁质脱乙酰酶1(HcCDA1)的克隆表达与酶活测定

• 作者: 孙晓彤 李少雅 李景 赵丹 郭巍 闫晓平
• 来源期刊: 中国生物防治学报
• 学科: 农学
• 关键词: 美国白蛾 几丁质脱乙酰酶 表达 几丁质脱乙酰酶活性
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 423-427
• 分类号: S763.42
• 语种: 中文
• DOI: 10.16409/j.cnki.2095-039x.2015.03.019

摘要

利用RACE-PCR方法,扩增得到编码美国白蛾Hyphantria cunea Drury几丁质脱乙酰酶基因HcCDA1.将该基因分别在大肠杆菌BL21和毕赤酵母细胞Pichia pastoris GS 115表达.经诱导表达后,Western blot分析表明HcCDA1在大肠杆菌中成功表达61.8 kD的蛋白,符合预期大小;在毕赤酵母GS115中成功表达80 kD蛋白.酶活性试验显示酵母细胞中表达的重组蛋白酶活力为1.685 U/mL.本研究利用毕赤酵母成功表达具有酶活力的重组HcCDA1蛋白,为进一步明确该蛋白的生理功能提供条件.