联合应用泛素分子基因的汉滩病毒嵌合基因GnS0.7、GcS0.7重组腺病毒的构建及鉴定

• 作者: 于澜 叶伟 张亮 张芳琳 李璞媛 程林峰
• 来源期刊: 传染病信息
• 学科: 医学
• 关键词: 汉坦病毒 腺病毒科 泛素
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 83-87
• 页数: 5页
• 分类号: R373.32
• 字数: 4864字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建含有泛素(ubiquitin , Ub)基因的汉滩病毒嵌合基因GnS0 . 7和GcS0 . 7重组腺病毒. 方法 通过PCR扩增获得Ub基因, 分别克隆入本室已构建的重组腺病毒转移载体pShuttle-pCAG-GnS0.7和pShuttle-pCAG-GcS0.7中,进一步通过双酶切将转移载体中的嵌合基因分别克隆入腺病毒载体, 得到重组腺病毒载体rAd-pCAG-Ub-GnS0.7和rAd-pCAG-Ub-GcS0.7,使用Pac Ⅰ线性化后转染HEK293细胞,包装后获得重组腺病毒,感染HEK293细胞后用免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay, IFA)检测表达产物. 结果 限制性内切酶酶切鉴定、PCR扩增和测序结果显示,各重组腺病毒转移载体及重组腺病毒载体构建正确. IFA检测到各重组腺病毒中目的蛋白的表达. 结论 成功制备了含有Ub基因的汉滩病毒嵌合基因GnS0.7和GcS0.7重组腺病毒, 为进一步研究联合Ub基因的汉滩病毒重组腺病毒的免疫学特性奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张芳琳	第四军医大学微生物学教研室	76	353	10.0	14.0
2	于澜	第四军医大学微生物学教研室	20	95	6.0	8.0
3	张亮	第四军医大学微生物学教研室	38	245	8.0	14.0
4	叶伟	第四军医大学微生物学教研室	7	25	2.0	5.0
5	程林峰	第四军医大学微生物学教研室	5	4	1.0	2.0
6	李璞媛	第四军医大学微生物学教研室	6	12	2.0	3.0