牦牛热休克蛋白70-12B基因(HSPA12B)的克隆及其在体外受精胚胎中的表达

• 作者: 何翃闳 余四九 刘鹏刚 吕鹏 崔燕 李秦 樊江峰 潘阳阳 郑红飞
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 牦牛 热休克蛋白70-12B基因(HSPA12B) 基因克隆 生物信息学分析 体外培养(IVF) 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 专题:牦牛生殖调控与发育免疫
• 页码范围: 1226-1233
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.09.012

摘要

为研究牦牛(Bos grunniens)热休克蛋白70-12B基因(heat shock 70 kD protein-12B,HSPA12B)的序列特性及其在体外受精胚胎中的表达情况,本研究根据黄牛(Bos taurus)HSPA12B基因序列5'端和3'端的保守序列设计特异性引物,RT-PCR扩增之后通过基因克隆得到HSPA12B基因(GeneBank登录号:KR258751),利用生物学信息软件对其进行生物学信息分析,并采用实时定量PCR(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测其在牦牛体外受精胚胎2-4细胞期、5-8细胞期、桑葚期、囊胚期4个不同时期胚胎中的表达水平.生物学信息分析结果显示,牦牛HSPA12B基因序列具有一个长705 bp的编码区,可编码234个氨基酸,其中丙氨酸(Ala)含量最高(10.3％),天冬酰胺(Asn)含量最少(0.9％);同源性和系统进化树分析显示,牦牛HSPA12B基因与黄牛HSPA12B的同源性最高,为99.5％,表明HSPA12B在进化中具有高度保守性;编码产物无信号肽,为非跨膜蛋白,不属于分泌蛋白,整体表现为亲水性.qRT-PCR检测结果显示,HSPA12B在牦牛体外受精2-4细胞期胚胎、5-8细胞期胚胎、桑椹胚和囊胚中均有表达;HSPA12B在2-4细胞期胚胎中的相对表达量分别是在5-8细胞期胚胎、桑椹胚和囊胚中相对表达量的14.814 8、4.269 9和40.485 8倍;HSPA12B在2-4细胞期胚胎中的相对表达量,均与在5-8细胞期胚胎、桑椹胚和囊胚中的相对表达量差异性极显著(P＜0.01).本研究提示,HSPA12B在牦牛体外受精胚胎的发育过程中非常重要,可能起着抑制细胞凋亡,延缓细胞衰老,调控胚胎早期发育的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余四九	甘肃农业大学动物医学院	165	736	11.0	19.0
2	樊江峰	甘肃农业大学动物医学院	32	116	7.0	9.0
3	崔燕	甘肃农业大学动物医学院	119	412	10.0	13.0
4	刘鹏刚	甘肃农业大学动物医学院	17	34	3.0	5.0
5	潘阳阳	甘肃农业大学动物医学院	40	69	5.0	7.0
6	郑红飞	甘肃农业大学动物医学院	4	5	1.0	2.0
7	何翃闳	甘肃农业大学动物医学院	11	18	2.0	4.0
8	李秦	甘肃农业大学动物医学院	6	21	2.0	4.0
9	吕鹏	甘肃农业大学动物医学院	5	12	1.0	3.0