棉铃虫β-actin基因的克隆、表达及多克隆抗体制备

• 作者: 刘小宁 李金耀 王新绘 程婷婷 赵洁 魏原杰 黄丽娜
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 棉铃虫 β-actin 克隆 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 138-145
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.12.020

摘要

克隆获得了棉铃虫β-actin基因，生物信息学分析表明，基因序列长1131 bp，编码376个氨基酸，理论分子量为41.77 kD，理论等电点5.16。氨基酸序列与其他物种肌动蛋白比较有98%-99%的一致性，与鳞翅目的家蚕具有99%的一致性。分析棉铃虫β-actin和小家鼠β-actin的抗原决定簇位点，发现两者抗原表位有70.63%的一致性。同时原核表达、纯化了棉铃虫β-actin蛋白，Western-blot结果表明表达正确。将纯化后的蛋白免疫ICR小鼠4次后，小鼠抗血清效价最高可达388800，并且能与天然棉铃虫蛋白特异性结合。