筛选小鼠Cltb启动子顺式元件结合蛋白的酵母单杂交文库的构建

• 作者: 吕学军 张永娟 李少莹 李玉英 郭亮 钱桂生 陆卫忠
• 来源期刊: 中华肺部疾病杂志（电子版）
• 学科: 医学
• 关键词: Cltb基因 酵母单杂交文库 转录调控
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-24
• 页数: 5页
• 分类号: R563
• 字数: 3722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-6902.2015.01.006

摘要

目的 利用酵母单杂交系统筛选与Cltb基因启动子结合的顺式元件,获得调控Cltb基因表达的转录因子,阐明Cltb基因的转录调控机理.方法 首先,构建表达Cltb调控序列的诱饵质粒pBait-AbAi,并将诱饵质粒转入Y1 HGold菌株,构建可稳定表达“诱饵-报告子”的酵母菌株;然后,运用SMARTTM技术构建小鼠肺组织酵母单杂交cDNA AD融合表达文库,并进行cDNA文库的筛选.结果 成功构建了筛选Cltb启动子顺式元件结合蛋白的酵母单杂交文库,该文库的转化效率为:9.35×105CFU/μg.通过对文库的筛选最后获得了5个阳性克隆并测序,得到5个可编码结合蛋白的基因,分别是Srrt、hnRNPs A/B 、Irf1、NKx2.5和Zfp953.结论 所构建的酵母单杂交文库符合实验要求,筛选的5个转录因子为研究Cltb基因表达调控奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱桂生	第三军医大学新桥医院全军呼吸病研究所	591	5662	33.0	52.0
2	李玉英	第三军医大学新桥医院全军呼吸病研究所	41	137	6.0	8.0
3	张永娟	广东医学院生理学教研室	10	44	5.0	6.0
4	郭亮	第三军医大学新桥医院全军呼吸病研究所	8	29	4.0	5.0
5	吕学军	第三军医大学新桥医院全军呼吸病研究所	6	23	4.0	4.0
6	陆卫忠	第三军医大学新桥医院全军呼吸病研究所	4	5	2.0	2.0
7	李少莹	第三军医大学新桥医院全军呼吸病研究所	1	0	0.0	0.0