两步串联层析法纯化抗TNF-α单克隆抗体

• 作者: 孙文正 杨彬 杨辉 林小鹊 谭世杰 马旭通
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 两步抗体纯化平台 抗TNF-α单克隆抗体 亲和层析 阳离子交换层析
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 75-80
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.12.011

摘要

旨在建立从重组CHO细胞发酵培养液中纯化抗TNF-α单克隆抗体的两步串联层析法。将含有抗TNF-α单克隆抗体的料液经两次离心、一步过滤的预处理后，用protein A填料捕获，阳离子填料Sourec30精细纯化。精细纯化过程中利用DoE的方法，采用CCF（Central composite face）设计，探讨了洗脱pH值及盐浓度对纯化的影响。纯化后的抗TNF-α单克隆抗体经HPLC以及毛细管电泳，检测其浓度、纯度以及多聚体含量。结果显示，亲和层析的最佳洗脱条件为pH4.0。通过DOE优化，为达到质量目标（回收率90%以上，纯度97%以上，多聚体0.3%），筛选出最佳洗脱范围为0.05-0.13 mol/L NaCl以及pH5.7-6.0，选定pH6.0与0.10 mol/L NaCl作为Source洗脱条件，此时回收率94.3%，纯度97.3%，多聚体0.3%，其质量与参比制剂接近。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙文正		15	27	3.0	4.0
2	杨彬		16	28	3.0	4.0
3	杨辉		3	3	1.0	1.0
4	马旭通		3	3	1.0	1.0
5	林小鹊		4	3	1.0	1.0
6	谭世杰		1	1	1.0	1.0