火鸡疱疹病毒 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PC R 检测方法的建立及应用

• 作者: 何诚 刘杉杉 姜良 孙伟 李永清 闫敏鑫 黄秀芬
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 火鸡疱疹病毒 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量PCR sorf 1
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 16-20
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.1|Q789
• 字数: 4688字
• 语种: 中文

摘要

针对火鸡疱疹病毒（HVT ）特异性的 sorf 1区基因序列设计引物，建立检测 HVT 的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法，并对其特异性、敏感性和重复性试验验证。结果表明，建立的实时荧光定量 PC R方法标准曲线的循环阈值（C t ）与模版拷贝数呈良好线性关系（r2＝0．99），熔解曲线分析显示该PC R扩增具有良好的特异性、敏感性和重复性，试验表明该方法最低检测浓度为7×101拷贝／μL。利用该方法对野生型 HVT和rHVT‐pmpD‐N在体内和体外的复制特性检测，结果表明重组后的HVT与野生型HVT的增殖速度基本一致。本试验建立的检测方法能够快速检测 HV T ，准确率高，特异性好，具有较高的灵敏度和稳定性，为监测HV T体内和体外的病毒含量和复制情况提供了一种有效的手段。