抗猪流感病毒单链抗体的原核表达及活性分析

• 作者: 刘迎春 杨康 王权 蒋蔚 陈永军
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流感病毒 单链抗体 原核表达 复性 活性
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 4556字
• 语种: 中文

摘要

为了深入研究抗猪流感病毒(SIV)单链抗体(scFv)的功能,以及抗体的放大生产和应用,在获得特异性抗体SIV scFv编码基因的基础上,建立该单链抗体的原核高效表达体系,并对表达产物进行复性纯化和活性测定.通过PCR从重组噬粒中扩增抗scFv基因,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中后,转化大肠杆菌BL21 (DE3)感受态细胞并诱导表达.SDS-PAGE和Westem blot分析表明重组scFv主要以包涵体形式表达,经过复性和纯化可获得可溶性的重组scFv,分子质量约为33 ku.间接ELISA和阻断ELISA表明,复性后的scFv与包被在酶标板上的SIV具有特异的结合反应,且具有浓度依赖性.重组scFv可以与其他2株SIV国内分离株特异性结合,提示重组scFv可能针对的是该病毒的保守区域.本研究成功获得了具有中和H1N1猪流感病毒活性的重组抗SIV scFv,为深入研究其功能以及进行大规模生产应用提供依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王权	中国农业科学院上海兽医研究所农业部寄生虫学重点开放实验室	65	346	11.0	15.0
2	蒋蔚	中国农业科学院上海兽医研究所农业部寄生虫学重点开放实验室	25	104	6.0	9.0
3	刘迎春	中国农业科学院上海兽医研究所农业部寄生虫学重点开放实验室	13	74	5.0	8.0
4	陈永军	中国农业科学院上海兽医研究所农业部寄生虫学重点开放实验室	27	211	10.0	14.0
5	杨康	中国农业科学院上海兽医研究所农业部寄生虫学重点开放实验室	5	19	3.0	4.0