人PD-L1基因转染细胞株的构建及其对活化的Jurkat细胞增殖和凋亡的影响

• 作者: 宋莉 居颂光 居颂文 徐永芳 曹莎莎 潘建忠 葛彦 谢炜
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: PD-L1 基因转染细胞株 Jurkat细胞
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 123-127
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3922字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13312/j.issn.1671-7783.y150003

摘要

目的:构建稳定表达人PD-L1分子的基因转染细胞株,观察其对活化的Jurkat细胞增殖和凋亡的影响.方法:将编码人PD-L1分子的全长cDNA重组入反转录病毒表达载体pEGZ-Term-R,将重组载体pEGZ-Term-R/PD-L1和辅助病毒载体用脂质体法共转染293T细胞,包装具有感染能力的完整病毒;收集含有完整重组反转录病毒的293T细胞培养上清,感染L929细胞,筛选并获得G418抗性的基因转染细胞.采用流式细胞术检测表达PD-L1的基因转染细胞,命名为L929/PD-L1.采用PHA活化T细胞系来源的细胞株Jurkat,并将其与丝裂霉素预处理的L929/PD-L1细胞共培养,用细胞计数法观察L929/PD-L1细胞株对活化的Jurkat细胞增殖能力的影响,并检测其凋亡情况.结果:成功获得了稳定表达人PD-L1基因的转染细胞株L929/PD-L1.PHA可诱导Jurkat细胞活化并表达PD-1分子;L929/PD-L1与PHA刺激后的Jurkat细胞共培养,可抑制Jurkat细胞增殖,促进其凋亡.结论:成功构建了稳定表达人PD-L1的细胞株,PD-L1分子抑制活化的Jurkat细胞增殖,促进其凋亡.