人CCAAT增强子结合蛋白α基因影响骨肉瘤细胞生长活性研究

• 作者: 冀全博 叶棋浓 张强 张立 徐亚梦 徐小洁 李玲 梁迎春 王岩 王涛 郭靖
• 来源期刊: 中国骨与关节杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CCAAT增强子结合蛋白α 骨肉瘤 基因,肿瘤抑制 肿瘤细胞,培养的
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 骨与软组织肿瘤
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: R738.1
• 字数: 3498字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-252X.2015.01.005

摘要

目的：构建带Myc(pXJ-40)标签的CCAAT增强子结合蛋白α(CCAATenhancerbindingproteinα，C/EBPα)的真核表达载体，并检测其对骨肉瘤细胞生长的影响。方法应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR )技术从人乳腺文库中扩增出C/EBPα全长编码区基因；将扩增基因克隆到Myc载体中，并将重组质粒转染人胚胎肾293T细胞；Western blotting检测表达情况；另将重组Myc-C/EBPα质粒转染人骨肉瘤细胞系U2OS (实验组)、Myc空载体质粒转染U2OS细胞(对照组)，生长实验检测C/EBPα对肿瘤细胞生长的影响。结果成功构建Myc-C/EBPα真核表达质粒，重组质粒转染人胚胎肾293T细胞后成功表达。生长实验显示Myc-C/EBPα转染的U2OS细胞的生长明显受限，随着培养时间延长，受抑制的程度逐渐增大，培养至第5天，Myc-C/EBPα转染的实验组细胞生长抑制率为58%，且细胞的生长速率OD＝0.495明显低于空白对照组1.179，差异有统计学意义(P＜0.01)。结论 C/EBPα对骨肉瘤细胞的生长具有抑制作用。