三种不同方法转染THP-1巨噬细胞效果比较

• 作者: 孙文逵 施毅 李培 苏欣 颜文杰
• 来源期刊: 中华肺部疾病杂志（电子版）
• 学科: 医学
• 关键词: THP-1巨噬细胞 腺病毒 慢病毒 细胞转染
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: R563
• 字数: 4568字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-6902.2015.01.003

摘要

目的 探讨通过腺病毒,慢病毒,脂质体2000三种方法转染THP-1巨噬细胞的最佳方法.方法 采用腺病毒,慢病毒,脂质体2000三种方法分别转染THP-1巨噬细胞,并用荧光显微镜观察细胞转染荧光表达情况,流式细胞仪检测THP-1细胞转染效率,台盼蓝染色检测细胞病死率.结果 腺病毒对THP-1巨噬细胞转染效率可在对细胞损伤较小的情况下达较高水平,但可能对细胞免疫状态影响大.MOI=200时,转染效率较低,仅为(29.81 ±2.50)％,细胞病死率为(5.17±0.44)％;MOI=800,转染效率最高,EGFP阳性率可达(86.49 ±6.11)％,细胞病死率为(8.80±0.54)％;MOI升至1200后,EGFP阳性率为(77.88±5.77)％,细胞病死率上升明显(14.50±0.77)％(P＜0.05);慢病毒转染效率高及细胞毒性较腺病毒低,但因其病毒产量低,实验消耗病毒量大,因而影响其应用.当MOI=10时,EGFP阳性率仅为(28.09±1.67)％,细胞病死率为(4.74±0.31)％;MOI=60时,转染率最高,EGFP阳性率为(91.96±1.66)％,细胞病死率升至(7.25±0.50)％,此时病死率才有统计学意义(P＜0.05).脂质体2000对THP-1巨噬细胞毒性较大,细胞死亡率高,转染效率极低,不适合转染.结论 腺病毒与慢病毒转染THP-1巨噬细胞各存在一定优劣,在实验中需酌情选择,脂质体2000不适宜转染THP-1巨噬细胞.