小分子干扰RNA沉默高迁移率族蛋白B1抑制肝星状细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原合成

• 作者: 李光明 范建高 葛文松
• 来源期刊: 实用肝脏病杂志
• 关键词: 肝星状细胞 小分子干扰RNA 高迁移率族蛋白B1 胶原
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 实验性肝炎
• 页码范围: 340-343
• 页数: 4页
• 字数: 3426字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5069.2015.04.002

摘要

目的 研究小分子干扰RNA(siRNA)干扰高迁移率族蛋白B1(HMGB l)表达对肝星状细胞(HSC)Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响.方法 将化学合成的HMGB 1基因特异性siRNA以脂质体包裹,转染HSC-T6细胞,设阴性对照和空白对照,抽提细胞总RNA和蛋白质,采用Western blot法检测细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达情况;采用细胞免疫荧光法检测Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达与定位;采用酶联免疫吸附法检测培养上清液中Ⅰ型和Ⅲ型胶原水平.结果 转染HMGB l基因特异性siRNA的HSC-T6细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白水平显著下调,免疫细胞化学检测也提示转染siRNA后细胞内Ⅰ型和Ⅲ型胶原水平较对照组明显降低;在培养72 h时,上清液Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原水平分别较对照组下降了(46.36±3.82)％和(41.92±3.58) ％(F=33.14,P＜0.01;F=27.56,P＜0.01).结论 HMGB 1特异性siRNA能高效抑制HSC-T6细胞胶原的合成和分泌,因而可能具有预防和治疗肝纤维化的潜力.