抗衰老 K lotho 蛋白减轻大鼠乳鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤

• 作者: 代文静 周敬群 张军 张家俊 曹志刚
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Klotho蛋白 缺氧/复氧 氧化应激 内质网应激 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: ? 论 著?
• 页码范围: 980-987
• 页数: 8页
• 分类号: R363
• 字数: 6508字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.06.004

摘要

目的：观察抗衰老Klotho蛋白对大鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧／复氧（ H／R）损伤的作用并探讨其作用机制。方法：建立大鼠乳鼠心肌细胞H／R模型，并将心肌细胞分为正常对照组、H／R模型组和不同浓度（0．1μmol／L、1μmol／L和10μmol／L） Klotho作用H／R组。观察各组心肌细胞H／R前后搏动频率变化，利用MTT方法检测细胞存活率；测定各组心肌细胞H／R后LDH、CK、AST的漏出量及MDA含量、SOD活性；流式细胞术检测各组心肌细胞的凋亡率；real－time PCR检测各组心肌细胞中内质网应激标记及凋亡相关分子GRP78、CRT和CHOP和caspase－12 mRNA的表达情况；Western blot法检测心肌细胞内内质网应激凋亡蛋白CHOP和caspase－12蛋白表达及Akt磷酸化水平。结果：与正常对照组相比，H／R模型组中心肌细胞搏动频率和细胞存活率显著下降，细胞凋亡率显著升高（P＜0．05）；LDH、CK、AST和MDA含量升高而SOD活性显著降低（P＜0．05）；GRP78、CRT、CHOP和caspase－12 mRNA表达显著增高（ P＜0．05）；CHOP和caspase－12蛋白表达随之增高而Akt的磷酸化水平显著降低（P＜0．05）。与H／R模型组相比，抗衰老Klotho蛋白作用H／R心肌细胞后，心肌细胞搏动频率和细胞存活率显著升高，细胞凋亡率逐渐降低（P＜0．05），LDH、CK、AST和MDA含量下降而SOD活性显著增高（P＜0．05），GRP78、CRT、CHOP和caspase－12 mRNA的表达逐渐降低（ P＜0．05），CHOP和caspase－12蛋白表达也随之降低，而Akt磷酸化水平显著增加（ P＜0．05）。结论：抗衰老Klotho蛋白能够提升H／R损伤后心肌细胞的存活率，抑制细胞凋亡，通过抵抗氧化应激和过度内质网应激反应发挥作用，并与激活Akt磷酸化有关。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周敬群	三峡大学仁和医院心血管内科	75	225	8.0	10.0
2	代文静	三峡大学仁和医院心血管内科	9	30	4.0	5.0