鱼类白介素(IL-1β)及干扰素(IFN)重组质粒构建及联合应用研究

• 作者: 刘慧吉 刘长有 李忠强 李秀颖 杜晓燕 熊占山 肖志国 郑伟 闫春梅
• 来源期刊: 黑龙江水产
• 学科: 农学
• 关键词: 白介素(IL-1β) 干扰素(IFN) 蛋白表达 核酸免疫 联合应用
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 科学试验
• 页码范围: 36-42
• 页数: 7页
• 分类号: S-942.1
• 字数: 3810字
• 语种: 中文

摘要

为增强鱼类自身防病抗病能力,本研究人工合成了细胞因子白介素(IL-1β)及干扰素(IFN)基因序列,分别与pIRES2-EGFP真核表达载体连接,构建荧光表达质粒.两种质粒分别接种Hela细胞,倒置于荧光显微镜下观察,确定质粒在细胞内的表达情况.之后将两种质粒注射免疫鱼体,于免疫后第2周抽样采集腹水、肌肉组织及血清,通过荧光、RT-PCR及SDS-PAGE方法检测目的蛋白表达情况.最后将两种质粒联合免疫待产虹鳟亲鱼,同时在人工授精过程中进行二次免疫,抽样采集孵化出的虹鳟鱼苗,检测目的蛋白表达情况.结果表明,两种质粒转染Hela细胞均可见荧光反应,空白对照无荧光,表明两种质粒在细胞内成功表达;室内动物试验结果表明只有两试验组腹水中检测到荧光信号,RT-PCR结果可见两试验组每组10尾均可检测到目的片段,空白组未检测到目的片段.SDS-PAGE显示,两试验组在40KD处可见目的条带;中试试验幼鱼可检测到荧光蛋白表达;试验组繁殖成活率97％,空白对照组繁殖成活率56％.以上结果证明人工合成IL-1β、IFN荧光质粒免疫鱼体,显著提高了鱼体自身免疫力,可有效的增强鱼体自身防病抗病能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闫春梅		26	44	4.0	5.0
2	李忠强		19	43	4.0	6.0
3	肖志国		17	52	5.0	7.0
4	郑伟		44	346	9.0	17.0
5	刘慧吉		17	34	4.0	5.0
6	杜晓燕		28	125	6.0	10.0
7	熊占山		32	83	4.0	8.0
8	李秀颖		28	119	7.0	9.0
9	刘长有		8	10	1.0	2.0