病原性鳗弧菌(Vibrio anguillarum)双重PCR与LAMP检测方法的建立

• 作者: 孙晶晶 张晓君 毕可然 白雪松 秦蕾 赵佳铭 阎斌伦 马丽娜 高晓建
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 鳗弧菌 毒力相关基因 双重PCR 环介导恒温扩增技术(LAMP)
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 49-55
• 页数: 7页
• 分类号: Q522
• 字数: 4609字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11758/yykxjz.20150608

摘要

本研究检测了分离自发病大菱鲆、半滑舌鳎及鲤鱼的22株病原鳗弧菌(Vibrio anguillarum)毒力相关基因的携带情况,并建立了病原鳗弧菌的分子生物学检测方法.以PCR方法检测8个毒力相关基因的分布,结果显示,22株病原鳗弧菌均可扩增出6个基因(empA、vah1、vah4、flaA、rtxA和tonB)目的条带,未扩增出virA和angM基因;针对vah4和rtxA设计引物进行双重PCR扩增,同一PCR反应体系可扩增出两条目的条带,灵敏度为2.4×103 CFU/ml,对照菌无任何扩增条带;以yah4设计引物进行LAMP扩增,病原鳗弧菌可扩增出阶梯状条带,呈现阳性反应,6株对照菌无阶梯状扩增条带且呈现阴性反应,LAMP扩增灵敏度为2.4×101 CFU/ml.LAMP检测灵敏度是双重PCR的100倍,LAMP技术与PCR比较,操作简便、快速、灵敏度高且不需昂贵仪器,LAMP检测鳗弧菌的方法更适合于养殖生产实际应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阎斌伦		264	2463	24.0	36.0
2	张晓君		45	582	14.0	22.0
4	秦蕾		34	336	10.0	17.0
5	马丽娜	吉林大学再生医学研究所	22	87	4.0	8.0
6	毕可然		25	202	8.0	13.0
7	孙晶晶		1	1	1.0	1.0
8	高晓建		1	1	1.0	1.0
11	白雪松		8	28	4.0	5.0
12	赵佳铭		1	1	1.0	1.0