鸭坦布苏病毒囊膜蛋白抗原表位的串联表达与抗原性分析

• 作者: 刘宇卓 安凤娇 李银 谢星星 赵冬敏 韩凯凯 黄欣梅
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 坦布苏病毒 合成多肽 表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 112-116
• 页数: 5页
• 分类号: S858.32
• 字数: 3898字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2015.01.017

摘要

在对鸭坦布苏病毒囊膜蛋白抗原表位分析的基础上,将已经筛选出的8条抗原性良好的多肽采用柔性肽拼接,转入T载体中.将酶切回收的串联基因(命名为TEM)克隆于表达载体pET32a中,获得重组表达质粒pET32a-TEM,将该质粒转化于感受态细胞BL21(DE3)中,经IPTG诱导后进行超声裂解,对融合蛋白进行可溶性分析、Western blotting分析和免疫原性分析.重组质粒pET32a-TEM的酶切和测序结果表明,TEM串联基因已成功插入到pET32a原核表达载体中;表达的pET32a-TEM融合蛋白分子质量约为38 000,以包涵体形式存在.Westernblotting和小鼠免疫试验结果显示,pET32a-TEM融合蛋白与鸭坦布苏病毒阳性血清能发生特异性反应,具有良好的抗原性.串联多肽的成功表达,将为鸭坦布苏病血清学检测方法建立、新型工程疫苗的研发奠定基础.