红掌细菌性叶疫病胁迫下实时荧光定量PCR (qRT-PCR)内参基因的筛选

• 作者: 尹俊梅 李崇晖 杨澜 洪阳 牛俊海 陆顺教 黄少华
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 红掌 细菌性叶疫病 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) 内参基因
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1178-1187
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.09.007

摘要

地毯草黄单胞菌花叶万年青致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.dieffenbachiae,Xad)引起的细菌性叶疫病是红掌(Anthurium andraeanum Linden)生产中最主要的病害.筛选出稳定可靠的内参基因,对于建立红掌叶疫病响应相关基因表达分析的实时荧光定量PCR (quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)技术体系、研究红掌-病菌互作的分子病理机制具有意义.本研究选择6个常用候选基因包括延伸因子1α(elongation factor1-α,EF1a)、甘油醛三磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GADPH)、泛素7(ubiquitin 7,UBQ7)、组蛋白H3(histidine 3,His3)、α微管蛋白(α-tubulin,TUB)和β-肌动蛋白(β-Actin,ACTB),进行PCR扩增效率筛选,筛选红掌抗、感品种叶片和系统侵染进程中的表达稳定性.经geNorm3.5、BestKeeper0.953及Normfinder1.0软件综合评价显示,不同候选基因的表达稳定性存在差异,其中UBQ7在红掌抗、感品种不同组织、时期表达均稳定,适合作为红掌叶疫病相关基因定量分析的内参基因,研究结果为红掌疫病应答的病理学研究提供了参考.