肿瘤坏死因子-α活化的人源骨髓间充质干细胞对结肠癌细胞 HT29生长及侵袭的影响

• 作者: 刘倩倩 孙蕴伟 蒋晓华 郁柳 陈柯
• 来源期刊: 中华消化杂志
• 关键词: 间充质干细胞 结肠肿瘤 细胞系 肿瘤 侵袭
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 386-389
• 页数: 4页
• 字数: 3500字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1432.2015.06.006

摘要

目的：探讨 TNF-α活化的人源骨髓间充质干细胞（MSC）对结肠癌细胞株 HT29生长、转移的影响。方法制备、收集 MSC 条件培养液（CM）及 TNF-α活化的 MSC（T-MSC）条件培养液（TCM）。采用 MTT 比色法检测在α-最低基础培养液（α-MEM）、CM、TCM 中培养2、4、6 d 的 HT29细胞增殖率。制备下层不接种细胞、接种 MSC 或接种 T-MSC，上层均含有 HT29细胞的双层软琼脂糖共培养体系，表面加入α-MEM 后培养30 d，检测单细胞肿瘤集落形成能力。利用悬滴法制备的 HT29肿瘤球进行3D 基质胶侵袭实验，检测α-MEM、CM、TCM 中 HT29细胞的侵袭能力。实时聚合酶链反应检测在α-MEM、CM、TCM 中培养的 HT29细胞中上皮钙黏素 mRNA 表达变化。两组数据比较采用成组 t 检验，多组数据比较采用单因素方差分析。结果培养4～6 d 后，CM 或 TCM 组 HT29细胞增殖率显著高于α-MEM 组（第4、6天各组吸光度值分别为0．57±0．06、0．51±0．02、0．22±0．01和0．45±0．01、0．73±0．04、0．15±0．02），差异均有统计学意义（tCM ＝8．090、21．140，tTCM ＝21．190、17．950；P 均＜0．05）。软琼脂糖实验培养后30 d，T-MSC 共培养的 HT29单细胞集落数目明显多于其他两组。3D侵袭实验中 TCM 刺激后 HT29向周围侵袭能力强于α-MEM 组[侵袭率分别为（82±2）％和（65±8）％]，差异有统计学意义（t＝2．848，P ＜0．05）。TCM 刺激后 HT29细胞中膜上皮钙黏素 mRNA 水平较α-MEM 组显著下降（0．32±0．02比1．00±0．00），差异有统计学意义（t ＝35．190，P ＜0．05）。结论TNF-α活化的人源 MSC 可促进结肠癌细胞生长及侵袭。