绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的初步建立

• 作者: 刘月 刘淑英 孙晓林 张宇飞
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊肺腺瘤病毒 囊膜蛋白 B细胞表位 单克隆抗体 ELISA
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 800-807
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.3
• 字数: 6134字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.05.016

摘要

为制备抗绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)囊膜蛋白(ENV)胞质尾区(CT)的单克隆抗体,利用生物信息学分析JSRV囊膜蛋白氨基酸序列,根据分析结果合成多肽,将此多肽分别连接钥孔血蓝蛋白(CT-KLH)和牛血清白蛋白(CT BSA),用CT-KLH作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合.建立间接ELISA方法筛选分泌抗CT蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,获得1株能稳定分泌抗CT蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为8E5,亚类为IgG2a/κ.间接ELISA检测培养上清效价为6.4×103,腹水效价为1×10 5.Western blot及免疫组化结果显示,这株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体能识别JSRV抗原,与其发生特异性反应.试验结果证明,单抗8E5是绵羊肺腺瘤的重要诊断试剂.应用8E5细胞株分泌的单克隆抗体建立JSRV-ENV的双抗体夹心ELISA检测方法,该ELISA检测方法特异性、重复性和敏感性良好,为快速检测诊断绵羊肺腺瘤和研究囊膜蛋白功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张宇飞	内蒙古农业大学兽医学院	14	29	3.0	4.0
2	刘淑英	内蒙古农业大学兽医学院	65	390	10.0	16.0
4	孙晓林	内蒙古农业大学兽医学院	6	12	2.0	3.0
7	刘月	内蒙古农业大学兽医学院	13	16	3.0	3.0