耐万古霉素肠球菌检测基因芯片方法的建立和验证

• 作者: 何莎 刘琪琦 周伟 宋燚 张五星 王升启 陈苏红
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 万古霉素 肠球菌,粪 万古霉素抗药性 芯片分析技术 耐万古霉素肠球菌 多重PCR 化学发光法
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 514-518
• 页数: 5页
• 分类号: R378.1
• 字数: 4669字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2015.07.006

摘要

目的：基于基因芯片技术建立一种能快速甄别粪肠球菌、屎肠球菌及万古霉素耐药基因的检测方法。方法根据GenBank中查找的2种常见肠球菌特异性基因序列（ ddl）及万古霉素耐药基因（ vanA，vanB）序列，设计与合成用于检测肠球菌的特异性基因及耐药基因的引物和探针，制备耐万古霉素肠球菌（VRE）检测基因芯片。利用多重不对称PCR法扩增样品中的特异性基因与耐药基因片段，标记产物与基因芯片上的探针杂交，经清洗、化学发光法显色后进行结果分析。在优化的多重PCR体系、杂交反应和化学发光法检测条件下，评价芯片的特异性、灵敏性和重复性。结果共筛选出1对通用引物、4对特异性引物和1条细菌通用探针、4条特异性检测探针。该芯片具有良好的特异性和重复性，灵敏性可达103 CFU／ml。10例临床分离株样本的芯片检测结果与药敏实验基本一致（8／10）。结论初步建立了检测VRE的基因芯片方法，利用此方法可以甄别2种VRE种类并检测其耐药基因。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王升启	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	315	3297	28.0	41.0
2	周伟		13	88	5.0	9.0
3	陈苏红	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	44	306	9.0	15.0
4	何莎	河北北方学院研究生部	1	2	1.0	1.0
5	宋燚	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	1	2	1.0	1.0
6	张五星		3	4	1.0	1.0
7	刘琪琦	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	16	66	5.0	7.0