重组质粒pVAX1-Hsp70/CD80DNA疫苗体内外表达

• 作者: 史小玲 唐利 李燕 王晓燕 钟森 陈庄 陈枫
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Hps70 CD80 DNA疫苗 体内外表达 免疫反应
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-26
• 页数: 5页
• 分类号: Q782|R392.9
• 字数: 3225字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建pVAX1-Hsp70/CD80质粒,观察其在体内外的表达,初步评估其有效性和安全性.方法 HindⅢ和XbaⅠ酶切质粒pcDNA3.1-Hsp70/CD80和载体pVAX1,将目的基因Hsp70/CD80定向连接入pVAX1中,鉴定构建的质粒pVAX1-Hsp70/CD8.将pVAX1-Hsp70/CD80质粒转染人胚肾293T细胞,Western blot法检测在转染细胞中Hsp70和CD80蛋白瞬时和稳定表达情况.用100μg pVAX1-Hsp70/CD80嵌合DNA疫苗免疫小鼠后,于第7天、15天、30天和180天用RT-PCR方法观察Hsp70和CD80在各组织中表达,Real time PCR检测IFN-γ和IL-4在脾脏中的表达.结果 经酶切和测序鉴定,重组质粒构建成功.转染24、48和72 h后的细胞以及G418筛选的稳定表达细胞株均有Hsp70和CD80的表达.第7天和第15天肌肉、淋巴结、骨髓、脾、肝、肺、肾和胸腺组织均有Hsp70和CD80表达.第30天肌肉、肺和肝有Hsp70表达.第180天均未检测出Hsp70和CD80表达.第7天和第15天IFN-γ有较高水平表达.结论 成功构建了pVAX1-Hsp70/CD80质粒,该重组质粒在一定时间内能高效表达Hsp70和CD80,并能诱导IFN-γ较高表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈庄	泸州医学院附属医院医学实验中心	58	230	8.0	11.0
2	陈枫	泸州医学院附属医院医学实验中心	118	523	11.0	15.0
3	钟森		82	309	8.0	13.0
4	李燕	泸州医学院附属医院医学实验中心	42	219	7.0	13.0
5	史小玲	泸州医学院附属医院医学实验中心	47	121	6.0	7.0
6	王晓燕	泸州医学院附属医院医学实验中心	11	26	3.0	4.0
7	唐利	泸州医学院附属医院医学实验中心	25	61	5.0	6.0