4种方法制备外周血淋巴细胞总 RNA对鹅α干扰素的影响比较

• 作者: 左伟勇 朱善元 王岑 王永娟
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 外周血 淋巴细胞 RNA提取 RT-PCR 方法比较 鹅 干扰素
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医
• 页码范围: 204-205,206
• 页数: 3页
• 分类号: S858.33
• 字数: 1334字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2015.05.068

摘要

无菌采取鹅外周血并进行抗凝处理，以全血提取法、细胞分离直接提取法、细胞分离培养提取法及细胞分离诱导提取法分别提取外周血中淋巴细胞的总RNA；紫外分光光度计检测总RNA的纯度和得率；以总RNA为模板通过RT－PCR法扩增鹅α－干扰素（ GoIFN－α）基因，并构建重组质粒pGEMT－α，通过比较GoIFN－α序列确定各种提取方法的可行性。结果显示，4种方法提取的RNA纯度高，均可作为模板扩增出目的基因，满足后续的分子生物学研究；其中以细胞分离直接提取法制备的RNA产量最多，此结论为外周血淋巴细胞总RNA的提取提供了一种更快捷的方法。