转化生长因子-β1通过产生活性氧诱导骨髓间充质干细胞分化为肌成纤维细胞

• 作者: 刘欣 李丽英 李伟阳 贾双双
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 转化生长因子β1 间充质细胞 细胞分化 活性氧 成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 737-742
• 页数: 6页
• 分类号: R329.28
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-167X.2015.05.002

摘要

目的：研究转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）诱导骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells ，BMSCs）向肌成纤维细胞分化的机制。方法：采用全骨髓贴壁培养法体外培养小鼠原代BMSCs ，将对数生长期的P3～P5代BMSCs作为实验细胞，使用不同浓度的TGF-β1诱导BMSCs向肌成纤维细胞分化，并在此基础上观察加入自由基清除剂 N-乙酰-半胱氨酸（ N-acetylcysteine ，NAC）对其分化的影响。采用实时荧光定量PCR及Western blot技术检测BMSCs分化指标α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、Ⅰ型胶原[col-lagenα1（Ⅰ），Col α1（Ⅰ）]和Ⅲ型胶原[collagen α1（Ⅲ）， Col α1（Ⅲ）]的表达情况。使用2’，7’-dichlorohydrofluorescein diacetate（DCFH-DA）预孵育BMSCs 15 min，然后加入TGF-β1处理不同时间，检测TGF-β1刺激下BMSCs中活性氧（ reactive oxygen species ，ROS）的产生，并使用高内涵方法对BMSCs中产生的ROS进行统计分析。结果：TGF-β1可以剂量依赖地诱导BMSCs向肌成纤维细胞分化，上调α-SMA、Col α1（Ⅰ）和Col α1（Ⅲ）的表达。 TGF-β1诱导BMSCs分化的作用可以被NAC阻断。 TGF-β1在BMSCs中能够引起ROS的产生，且该过程迅速而短暂，当TGF-β1作用30 min时，其在BMSCs中诱发的ROS达到峰值。结论：TGF-β1通过产生ROS介导BMSCs向肌成纤维细胞分化。