C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖化学结构核磁共振检测方法的建立

• 作者: 于旭博 刘方蕾 吴兵 孔素娟 李阿妮 杨英英 罗树权 胡浩 袁菲
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 化学
• 关键词: 脑膜炎球菌 荚膜多糖 核磁共振
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 390-397
• 分类号: R378.1+5|O654.9
• 字数: 2724字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立基于核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)技术检测C群脑膜炎球菌荚膜多糖(group C meningococcal capsular polysaccharide,GCMP)、Y群脑膜炎球菌荚膜多糖(GYMP)和W135群脑膜炎球菌荚膜多糖(GWMP)化学结构的方法.方法 建立1H-NMR检测方法:使用布鲁克600 MHz超导傅里叶核磁共振谱仪,配置5 mm BBO正向宽带高分辨液体探头.脉冲程序为水峰压制(zgpr),温度为298 K(25℃).具体参数设置如下:中心频率约为4.7 ppm;图谱宽度为7 211 Hz;采样时间为2.272 s;弛豫延迟时间为2s;扫描次数为512次;信号经傅里叶转换后加入1.0Hz的窗口函数,检测结果使用Topspin 3.0软件进行处理.验证该方法的专属性、重复性及中间精密性.结果 5批GCMP、GYMP和GWMP检测结果的CV值均小于0.35％;3个浓度GCMP、GYMP和GWMP在相同的操作条件下以及不同工作日间、不同实验员间的检测结果的CV值均小于0.35％.结论 建立的1H-NMR检测方法简便、快速、准确,检测GCMP、GYMP和GWMP具有极高的专属性、重复性和中间精密性,适用于疫苗生产研究中GCMP、GYMP和GWMP样品的定性结构鉴定.