摘要:
目的 应用来曲唑建立多囊卵巢(PCO)大鼠模型,从组织及细胞水平测定模型大鼠卵巢氧化应激状态,探讨卵巢氧化应激在多囊卵巢综合征(PCOS)发病中的作用,为PCOS治疗提供新的思路.方法 将6周龄清洁级雌性SD大鼠,随机编为实验组[45只,予1%羧甲基纤维素溶液1 mL/d+来曲唑1 mg/(kg·d)灌胃]和对照组(45只,仅予1%羧甲基纤维素溶液1 mL/d灌胃),均持续28 d.每日定时行阴道细胞涂片巴氏染色镜检,判断动情周期,每7d测量体质量了解生长情况,第29 d两组大鼠统一处死、采血.测量指标:血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、促卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、性激素结合蛋白(SHBG),计算游离雄激素指数(FAI);解剖子宫、卵巢,称重后计算器官质量指数;所得两侧卵巢,一侧固定后石蜡切片HE染色,另一侧制备组织匀浆、单细胞悬液,测定组织匀浆总氧化态(TOS)、总抗氧化态(TAS)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力;检测卵巢单细胞悬液细胞内活性氧(ROS)水平.通过比较两组大鼠上述指标的差异,验证造模是否成功,分析卵巢组织氧化应激水平与PCOS的关系.结果 ①实验组用药12~15 d后动情周期消失,体质量增长明显超过对照组(P<0.05);②实验组性激素改变符合人类PCOS特征;③实验组卵巢质量、卵巢指数大于对照组(P<0.05),子宫质量、子宫指数小于对照组(P<0.05);④相对对照组大鼠,实验组大鼠卵巢HE切片镜下表现为卵泡数量增多、白膜增厚、颗粒细胞层变薄、间质增生等改变;⑤实验组大鼠卵巢组织内MDA含量、TOS、氧化应激指数(OSI)高于对照组,SOD活力、TAS低于对照组(P<0.05);细胞内ROS水平高于对照组(P均<0.05).结论 ①应用来曲唑可成功诱导大鼠PCO模型,适于研究卵巢病变.②本方法所制备的PCO模型卵巢处于明显的氧化应激状态,存在细胞氧化损伤,推测人类PCOS卵巢组织内可能也存在氧化应激,因此对于PCOS的处理,在常规药物治疗同时,应注重抗氧化治疗.