两种肝组织匀浆上清液诱导人脐带间充质干细胞向肝细胞分化的比较

• 作者: 侯艳宁 刘建芳 吴丽颖 薛改 闫成
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 脐带脐血干细胞 肝纤维化 肝组织匀浆上清液 微环境 人脐带间充质干细胞 诱导分化 肝细胞 细胞色素P450酶 白蛋白
• 年，卷（期）: 2015,（19）
• 所属期刊栏目: 脐带脐血干细胞
• 页码范围: 2993-2998
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 7089字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.19.007

摘要

背景:前期研究证明正常大鼠肝组织匀浆上清液可诱导人脐带间充质干细胞定向分化为具有部分肝细胞功能的肝样细胞,而肝纤维化大鼠肝组织匀浆上清液的诱导可行性及与前者诱导效果的比较尚不明确.目的:比较正常肝组织及纤维化肝组织微环境诱导人脐带间充质干细胞向肝细胞分化的能力.方法:采用腹腔注射3%硫代乙酰胺生理盐水溶液(200 mg/kg,2次/周,共4周)的方法制备SD大鼠肝纤维化模型,取肝纤维化大鼠及正常大鼠肝脏制备肝组织匀浆上清.将第 3 代人脐带间充质干细胞进行分组诱导培养:①标准对照组:加入含体积分数为 10%胎牛血清的 DMEM/F12 培养基.②纤维化肝组织匀浆组:加入含体积分数为10%胎牛血清及50 g/L纤维化肝组织匀浆的DMEM/F12培养基.③正常肝组织匀浆组:加入含体积分数为10%胎牛血清及100 g/L正常肝组织匀浆的DMEM/F12培养基.诱导开始后于倒置显微镜下观察各组细胞形态学变化;取标准对照组及诱导7 d的匀浆组细胞采用Western Blot法检测CK18、AFP、CYP3A4、CYP2E1、CYP2D6、TPH2的表达情况,采用ELISA法测定各组细胞培养液中白蛋白水平.结果与结论:与标准对照组长梭形成纤维样细胞相比,诱导7 d时,肝纤维化匀浆组及正常匀浆组细胞形态变化明显,呈类圆形,胞体丰满.与标准对照组相比,两匀浆组细胞均可表达肝细胞标志物CK18和AFP.标准对照组细胞可表达少量CYP2E1,两匀浆组细胞表达CYP3A4、CYP2E1、CYP2D6、TPH2等肝细胞功能蛋白,且CYP2E1的表达量较标准对照组明显增加(P < 0.01),而两匀浆组间上述蛋白的相对表达量差异无显著性意义(P > 0.05).同时,两匀浆组细胞分泌白蛋白的能力较标准对照组亦明显增强(P < 0.01),两匀浆组相比差异无显著性意义(P > 0.05).实验结果显示正常肝组织和纤维化肝组织微环境均可诱导人脐带间充质干细胞向肝细胞分化,在达到相同诱导效果时,纤维化肝组织所需组织液浓度更低,提示纤维化肝组织微环境可能更有利于人脐带间充质干细胞向肝细胞分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘建芳	解放军白求恩国际和平医院药剂科	16	90	6.0	9.0
2	侯艳宁	解放军白求恩国际和平医院药剂科	35	233	9.0	13.0
3	闫成		12	64	5.0	7.0
7	薛改	解放军白求恩国际和平医院药剂科	6	26	3.0	5.0
8	吴丽颖	解放军白求恩国际和平医院药剂科	1	7	1.0	1.0