荧光分析活性氧在血管紧张素Ⅱ诱导心肌成纤维细胞增殖中的作用

• 作者: 周艳 杨世杰 王璇 王立英 苏海燕
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: N-乙酰半胱氨酸 血管紧张素Ⅱ 氧自由基 心肌成纤维细胞 蛋白激酶Cα 活性氧
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1870-1875
• 页数: 6页
• 字数: 4817字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11895/j.issn.0253-3820.150331

摘要

应用荧光分析方法探讨活性氧(Reactive oxygen species,ROS)在血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,Ang Ⅱ)诱导心肌成纤维细胞(Myofibroblasts,myoFbs)增殖中的作用.实验中采用胰酶消化法分离、培养原代新生大乳鼠myoFbs,10％胎牛血清培养,采用2～3代myoFbs,并随机分为正常对照组、AngⅡ处理组、N-乙酰半胱氨酸(N-Acetyl-L-cysteine,NAC)干预组,培养12、24和36 h后,分别采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5)-Dimethylthiahiazo (-z-yl)-3,5-diphenyt-etrazoliumromide,MTT)法测定myoFbs的增殖率;硝酸酶还原法检测myoFbs产生羟自由基(·0H)的量;利用荧光探针DCFH-DA分析检测myoFbs中ROS的水平;免疫细胞化学染色法及荧光共聚焦测定p-PKCα的表达及膜转位.结果显示一定浓度的AngⅡ作用myoFbs 24 h时myoFbs增殖率明显增加(η值(％)为117.05);并诱导myoFbs产生大量ROS,其中myoFbs增殖率越高,·OH的含量(94.53±1.68)越高;免疫细胞化学染色及荧光共聚焦可见,AngⅡ能明显促进pPKCα的表达及膜转位(与对照组比较p＜0.01或p＜0.001);NAC(104 mol/L)可抑制AngⅡ引起myoFbs的增殖(OD值为0.357±0.13),减少myoFbs内ROS及·OH的量(75.57±1.48),抑制p-PKCa的表达及膜转位.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨世杰	吉林大学基础医学院药理教研室	148	1738	23.0	33.0
2	王立英	北华大学基础医学院生理教研室	17	118	5.0	10.0
3	周艳	北华大学基础医学院生理教研室	16	68	4.0	7.0
4	苏海燕	吉林省肿瘤医院预防保健科	29	49	4.0	5.0
5	王璇	北华大学基础医学院生理教研室	4	19	3.0	4.0