拟南芥硫酯酶基因在毕赤酵母中的表达

• 作者: 戴琨 李忠奎 王瑞明 王腾飞 郝昭程 郝梓凯
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 拟南芥 脂酰-ACP硫酯酶 毕赤酵母 基因重组表达 游离中链脂肪酸 胞外
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 工业生物技术
• 页码范围: 115-122
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.140205

摘要

硫酯酶在生物体内能催化水解脂酰酰基载体蛋白和饱和脂肪脂酰链,对中链脂肪酸(Medium chainfatty acids,MCFAs)的积累起着关键作用.为获得具有生产中链脂肪酸能力的工程菌,以拟南芥cDNA为模板,PCR扩增得到其脂酰-ACP硫酯酶基因AtFatA,经EcoR Ⅰ/XbaⅠ双酶切后连接至同样双酶切的质粒中,获得重组质粒pPICZαA-AtFat.将重组质粒电击转入毕赤酵母GSl15中,通过Zeocin抗性筛选,挑选出阳性克隆子并摇瓶发酵诱导,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析获得明显目的蛋白条带,首次成功构建AtFatA的真菌表达系统.气质联用法检测发酵产物胞外游离脂肪酸,发现毕赤酵母AtFatA重组菌株比起始GSll5菌株胞外游离MCFAs(主要是辛酸)产量增加51％,MCFAs产量占胞外总脂肪酸产量的28.7％,而野生菌中这一比例仅有18.1％,这为日后生产安全无毒害的MCFAs探索了一条新的途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王瑞明	齐鲁工业大学食品与生物工程学院	33	84	5.0	6.0
2	王腾飞	齐鲁工业大学食品与生物工程学院	19	55	5.0	5.0
3	郝昭程	齐鲁工业大学食品与生物工程学院	8	22	3.0	4.0
4	李忠奎	齐鲁工业大学食品与生物工程学院	2	4	1.0	2.0
5	戴琨	齐鲁工业大学食品与生物工程学院	4	25	4.0	4.0
6	郝梓凯	齐鲁工业大学食品与生物工程学院	2	5	1.0	2.0