TALENs编辑绵羊成纤维细胞FGF 5基因

• 作者: 刘守仁 周平 唐红 张译元 王新华 王立民 皮文辉 郭延华
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 类转录激活因子效应物核酸酶 基因组编辑 成纤维细胞生长因子5基因 单核苷酸多态 绵羊
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 704-710
• 页数: 7页
• 分类号: S826.2
• 字数: 4661字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.05.004

摘要

类转录激活因子效应物(Transcription activator-like effector,TALE)已经成为基因组编辑和基因转录调控的有效工具,在多个物种的基因组中实现特定位点的删除、插入和突变.针对绵羊成纤维细胞生长因子5 (Fibroblast growth factor 5,FGF 5)基因起始密码子ATG位点,设计构建TALENs(Transcription activator-like effector nucleases,TALENs).通过比较分析正常培养和基因组编辑处理的绵羊成纤维细胞,电转TALENs组合,Surveyor突变检测,筛选获得1对有效的TALENs.有限稀释细胞传代培养,PCR扩增FGF 5基因片段,经PAGE检测筛选发生突变的细胞,测序确认FGF 5基因ATG位点产生缺失突变细胞.获得具有编辑活性的TALENs,为该基因的定点编辑奠定基础.Surveyor检测和测序结果表明,在绵羊FGF 5基因ATG起始密码子上游104碱基位点,存在1个G/C单核苷酸多态.