C型凝集素受体Langerin的细胞表达模型构建及功能研究

• 作者: 姚煦 张宇 张晓宁 李巍 罗阳
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 树突细胞 受体,有丝分裂原 重组融合蛋白质类 尘螨科 HEK293细胞 受体,模式识别 Langerin
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 408-412
• 页数: 5页
• 字数: 4093字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2015.06.012

摘要

目的 构建朗格汉斯细胞特异性C型凝集素受体Langerin体外细胞表达模型.方法 PCR方法获得Langerin分子的cDNA,克隆入真核绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-C1(EGFP位于Langerin的N末端),转染人肾胚细胞癌HEK 293T细胞后,激光共聚焦显微镜检测EGFP-Langerin融合蛋白的细胞表达情况,流式细胞仪检测Langerin受体的表达,并进一步检测转染表达的Langerin受体对尘螨抗原(nDerp 2)的识别和内吞情况.结果 构建的荧光融合蛋白重组表达质粒转染HEK 293T细胞后,经PCR及Western印迹检测证明Langerin转染及表达成功.重组表达质粒转染HEK293T细胞后,经流式细胞仪检测转染Langerin融合质粒的HEK293T细胞的Langerin受体表达率较转染前增多约43％,经激光共聚焦显微镜检测显示绿色荧光标记的Langerin成功表达,并可与红色荧光素标记的尘螨抗原(nDerp 2)结合,将nDer p 2内吞入细胞内.结论 构建的EGFP-Langerin融合蛋白在HEK293T细胞内表达后具有细胞表面受体分子的特征性分布,具有结合、内吞过敏原功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李巍		90	260	9.0	12.0
2	姚煦	中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所	78	210	7.0	11.0
3	张宇	中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所	22	71	3.0	7.0
4	张晓宁	中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所	2	3	1.0	1.0
5	罗阳	中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所	4	5	2.0	2.0