柱前衍生化法测定L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐的对映异构体

• 作者: 吴晓明 邓雪涛
• 来源期刊: 中国药物评价
• 学科: 医学
• 关键词: L-亮氨酸叔丁酯 Marfey试剂 柱前衍生化 高效液相色谱法
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 评价技术与方法
• 页码范围: 73-75
• 页数: 3页
• 分类号: R917.7
• 字数: 2385字
• 语种: 中文

摘要

目的：建立柱前衍生化-高效液相色谱法（ HPLC）测定L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐中对映异构体的方法。方法：采用Nα-（2，4-二硝基-5-氟苯基）-L-丙氨酰胺（Marfey试剂）作为柱前衍生试剂，反应温度40℃，反应时间2.5 h，衍生试剂加入量为35μL的1％Marfey溶液；色谱柱：Alltech Apollo C18（150 mm ×4.6 mm，5μm），流动相A：水，流动相B：甲醇，线性梯度洗脱，检测波长：340 nm，柱温：30℃，流速：1.0 mL· min－1，进样量：10μL。结果：L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐在1.15～23.2μg· mL－1范围内线性关系良好，r＝0．9995；测得检测限为0.4 ng，定量限为1.7 ng；平均回收率104.4％，相对标准偏差（ RSD）为3.4％；重复性实验中RSD为3.3％；此方法耐用性良好，L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐衍生产物溶液体系稳定。结论：本方法灵敏、简便、专属性强，能对L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐的对映异构体进行检测及定量分析。