BMP-2表达上调剂的筛选及其抗骨质疏松活性研究

• 作者: 司书毅 宫世强 李雪虹 王艳宏 韩小婉
• 来源期刊: 中国医药生物技术
• 关键词: 骨质疏松 高通量筛选 骨形态发生蛋白质 2
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 236-241
• 页数: 6页
• 字数: 3915字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2015.03.008

摘要

目的筛选上调骨形态发生蛋白2（BMP-2）表达的新型小分子活性化合物，为研发抗骨质疏松药物提供先导化合物。<br>　　方法应用国家新药（微生物）筛选实验室前期建立的BMP-2表达上调剂的高通量筛选模型，对化合物库中10000余个化合物进行筛选，以染料木素作为阳性对照；应用实时定量 PCR 和 Western blot 方法检测活性化合物对 U-2OS 细胞 BMP-2 mRNA 和蛋白表达水平的影响。在mRNA 水平考察了活性化合物对 Runx2表达的影响， Western blot 法检测活性化合物对 Smad1/5/8蛋白磷酸化水平的影响；用 PNPP 法检测碱性磷酸酶活性，验证活性化合物体外促进成骨细胞分化的作用。<br>　　结果在 BMP-2表达上调剂模型细胞上筛选得到活性化合物 E19773，其在模型细胞上的 EC50为46.2μmol/L；实时定量 PCR 结果显示，化合物 E19773能够提高 U-2OS细胞 BMP-2和 Runx2的 mRNA 表达水平；Western blot结果显示，Smad1/5/8蛋白磷酸化水平明显升高；碱性磷酸酶结果表明 E19773能够在体外促进成骨细胞的分化。<br>　　结论化合物 E19773在0.75~50μmol/L 浓度范围内能明显上调 BMP-2的表达，主要通过 Smads 通路来调控细胞成骨分化，是活性较好的 BMP-2上调剂。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	司书毅	中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所	31	125	7.0	8.0
2	王艳宏	黑龙江中医药大学药学院	133	896	13.0	24.0
3	韩小婉	中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所	1	5	1.0	1.0