UHRF1基因沉默可促进人肺腺癌A549细胞的凋亡

• 作者: 刘青 吴凤鹏 景绍武 杨从容 王军 程云杰 赵学涛 边晨峰
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 肺肿瘤 慢病毒感染 RNA干扰 细胞凋亡 UHRF1基因
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1222-1229
• 页数: 8页
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2015.11.618

摘要

目的:探讨慢病毒介导的shRNA干扰泛素样含PHD和环指域1[ubiquitin-like with plant homeodomain (PHD) and ringfinger domain 1,UHRF1]基因表达对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其可能的作用机制.方法:应用蛋白质印迹法从4条针对UHRF1基因的RNA干扰慢病毒载体中筛选出1条敲减效率最高的pGC-UHRF1-shRNA-LV-GFP#1包装成慢病毒.实验设未进行感染的空白对照组、感染非特异性shRNA的阴性对照组和感染pGC-UHRF1-shRNA-LV-GFP#1的UHRF1 shRNA组.慢病毒感染A549细胞后,应用RT-PCR法检测各组细胞中UHRF1 mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测各组细胞中UHRF1、Bax、caspase 9和Bcl-2蛋白的表达水平;FCM法检测各组细胞的凋亡情况.结果:慢病毒pGC-UHRF1-shRNA-LV-GFP#1感染A549细胞后明显下调UHRF1 mRNA和蛋白表达水平(P值均＜0.01).UHRF1 shRNA组A549细胞的凋亡率显著高于空白对照组和阴性对照组(P＜0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平显著下调(P＜0.01),而促凋亡蛋白Bax和caspase 9的表达水平显著上调(P值均＜0.01).结论:慢病毒介导的shRNA沉默UHRF1基因表达可促进人肺腺癌A549细胞的凋亡,其作用可能与上调Bax、caspase 9蛋白表达和下调Bcl-2蛋白表达有关.