砀山酥梨果实COMT基因的克隆和表达分析

• 作者: 尹梅 张金云 徐义流 林毅 程敏 蔡永萍 邹鹤伟 金青 闫冲冲
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 砀山酥梨 PbCOMT 生物信息学分析 原核表达 荧光定量表达
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 454-461
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2015.03.0454

摘要

梨果实石细胞的发育和木质素的合成、转运及沉积密切相关.咖啡酸氧甲基转移酶(COMT)是木质素合成途径中的1种关键酶,主要参与紫丁香基木质素(syringyl lignin,S-木质素)的生物合成.本研究以砀山酥梨果实为材料,利用RT-PCR技术并结合RACE方法,得到砀山酥梨COMT基因的全长cDNA,命名为PbCOMT(GenBank登录号为KC905086).该基因全长1 371 bp,开放阅读框为1 098 bp,编码365个氨基酸.进化树分析发现砀山酥梨COMT蛋白具有很高同源性,与苹果的相似性达到94％.将该基因重组到表达载体pET-32a(+)中进行原核表达,电泳检测到1条大约60.0 kD的外源蛋白,与预测的融合蛋白分子量相符.荧光定量表达分析得知,梨果实PbCOMT基因表达量变化与木质素的含量变化趋势基本一致,并且和石细胞发育规律有很大的相关性.本研究为阐明梨石细胞发育分子机理奠定基础,为分子调控石细胞含量、改善梨果实口感提供了科学依据.