干扰MH-S细胞株β-catenin表达的shRNA慢病毒载体构建及功能鉴定

• 作者: 刘静 张明 杨德一 杨雪莹 王延让 王欣
• 来源期刊: 中华疾病控制杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA 慢病毒属 细胞因子类
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 922-925
• 分类号: R181
• 语种: 中文
• DOI: 10.16462/j.cnki.zhjbkz.2015.09.016

摘要

目的 针对β-catenin基因构建短发夹RNA (short harpin RNA,shRNA)慢病毒表达载体,鉴定β-catenin基因干扰效率,并检测其对小鼠肺泡巨噬细胞株MH-S功能的影响.方法 设计并构建5个针对β-catenin基因的shRNA干扰载体.实验分为空白细胞对照组(MH-S)、二氧化硅诱导组(silica)、病毒干扰组(silica+LV-shβ-catenin)、病毒对照组(silica+LV-shβ-catenin-NC)4组,realtime-PCR检测各组细胞β-catenin基因mRNA的表达水平,ELISA检测各组细胞培养上清中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β,TGF-β1)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的分泌情况.结果 二氧化硅诱导后,与silica组和silica + LV-shβ-catenin组比较,silica+LV-shβ-catenin-NC组β-catenin mRNA的表达率降低(均有P＜0.05),silica+LV-shβ-catenin-NC组TGF-β1、IL-6和TNF-α的分泌减少(均有P＜0.05).结论 构建的shRNA慢病毒载体能够有效抑制经二氧化硅诱导的MH-S细胞株β-catenin基因表达,并抑制TGF-β1、IL-6和TNF-α的分泌,为体内矽肺纤维化的分子机制研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张明	天津市疾病预防控制中心职业病预防控制所	57	386	10.0	17.0
2	王延让	天津市疾病预防控制中心职业病预防控制所	48	335	8.0	16.0
3	杨德一	天津市疾病预防控制中心职业病预防控制所	30	134	8.0	10.0
4	刘静	天津市疾病预防控制中心职业病预防控制所	47	241	9.0	14.0
5	王欣	天津市疾病预防控制中心职业病预防控制所	41	287	10.0	15.0
7	杨雪莹	天津市疾病预防控制中心职业病预防控制所	41	301	11.0	16.0