红鳍东方鲀干扰素γ基因的原核表达

• 作者: 仇雪梅 刘洋 刘海映 姜志强 孙赛红 张涛 李慧 王玉芳 王秀利 马普
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 红鳍东方鲀 干扰素γ 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 174-179
• 页数: 6页
• 字数: 4796字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.12.025

摘要

旨在探究一种简单高效的获取重组红鳍东方鲀IFNγ蛋白的方法。提取红鳍东方鲀（Takifugu rubripes）肾脏组织的总RNA，并以其为模板进行RT-PCR扩增干扰素γ（IFNγ）基因序列。将IFNγ成熟肽序列与表达载体pET-32a（+）相连，成功构建了重组表达载体PET-32a-IFNγ。将其转化入E. coli BL21（DE3）感受态细胞后获得了重组表达IFNγ的基因工程菌。经IPTG诱导， pET-32a-IFNγ在BL21中得到了表达。通过对表达产物的纯化和Western blotting检测，结果显示红鳍东方鲀IFNγ基因在大肠杆菌中的表达准确，且目的蛋白表达量较高。