日本血吸虫促凋亡基因SjBAD真核表达及其功能研究

• 作者: 傅志强 刘艳涛 洪炀 王涛 陆看 韩倩 韩宏晓 马帅 马茜茜
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 日本血吸虫 真核 细胞凋亡 BAD
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 70-75
• 页数: 6页
• 分类号: S852.7
• 字数: 3776字
• 语种: 中文

摘要

根据日本血吸虫促凋亡基因SjBAD的参考序列设计引物,应用PCR技术扩增SjBAD,选用pcDNA3.1(+)真核表达载体,构建pcDNA3.1(+)-SjBAD,并将其转染到293T细胞内,采用实时定量PCR检测SjBAD在转染人293T细胞培养不同时期后的转录水平;利用细胞流式术检测pcDNA3.1(+)-SjBAD转染入293T细胞后细胞的凋亡水平.结果:成功克隆、表达了日本血吸虫SjBAD基因,构建了真核重组表达质粒pcDNA3.1(+)-SjBAD,并将其转染人293T细胞内,利用实时定量PCR检测SjBAD在转染人293T细胞培养36h后转录水平最高.利用细胞流式术检测pcDNA3.1(+)-SjBAD转染入293T细胞后可以引起细胞凋亡.本文为研究线粒体细胞凋亡通路和血吸虫的生长发育奠定基础.