POMC在不同毛色绵羊皮肤中的表达与定位

• 作者: 李亚楠 杨磊 王海东 董常生 赫晓燕 马淑慧
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 绵羊 POMC Western blotting 免疫组织化学
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 畜牧?兽医?资源昆虫
• 页码范围: 1818-1824
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.09.15

摘要

【目的】对不同毛色绵羊皮肤中的阿黑皮素原（proopiomelanocortin，POMC）进行定位和表达差异分析，确定POMC与毛色形成的关系，进一步丰富有关哺乳动物毛色形成机制的理论知识。【方法】选取年龄相近的雄性黑色和白色成年绵羊各3只，用取皮器分别在臀部采集皮肤组织3块，对其中一块制作石蜡切片后采用免疫组织化学法确定POMC在不同绵羊皮肤中的定位，另两块置于液氮中冻存后分别提取皮肤总RNA和总蛋白，总RNA经反转录成cDNA后，经NCBI分析比对后设计POMC特异性PCR引物，采用QRT-PCR方法检测POMC基因在mRNA水平的表达差异；总蛋白经SDS-PAGE凝胶电泳后，采用Western blotting方法加入POMC多克隆抗体检测POMC在蛋白水平的表达差异，得出的数据用SPSS19.0软件进行差异显著性分析，探讨POMC对毛色形成机制的调控作用。【结果】免疫组织化学结果显示POMC在黑色和白色绵羊皮肤中均有表达，且表达部位都位于毛囊根鞘周围和表皮的皮肤角质形成层细胞内；QRT-PCR结果显示POMC在黑色绵羊皮肤中mRNA的相对表达量为2.5004±0.2577**，而在白色绵羊皮肤中POMC的mRNA的相对表达量为1.0032±0.0350，黑色绵羊皮肤中POMC的mRNA的相对表达量为白色绵羊皮肤的2.5倍，二者表达差异极显著（P＜0.01）；Western boltting结果显示黑色绵羊皮肤POMC蛋白水平相对表达量为1.5253±0.0426*，而白色皮肤中POMC蛋白水平相对表达量为1.0005±0.0180，黑色皮肤POMC蛋白表达量是白色皮肤的1.55倍（P＜0.05），两者差异显著。【结论】试验表明POMC可在黑色和白色绵羊皮肤中正常表达，且其表达位置一致，但POMC在不同毛色绵羊皮肤组织中mRNA和蛋白的表达水平存在一定的差异，表明POMC的表达量变化会在一定程度上影响毛色的生成。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董常生	山西农业大学动物科技学院	152	794	13.0	20.0
2	赫晓燕	山西农业大学动物科技学院	102	379	8.0	15.0
3	王海东	山西农业大学动物科技学院	26	63	5.0	7.0
4	杨磊	山西农业大学信息学院	7	15	2.0	3.0
5	马淑慧	山西农业大学动物科技学院	6	14	2.0	3.0
6	李亚楠	山西农业大学动物科技学院	4	8	2.0	2.0