番木瓜环斑病毒海南株系植物RNAi表达载体的构建

• 作者: 孔华 张雨良 彭明 曾会才 朱芸 贾瑞宗 赵辉 郭安平
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番木瓜 番木瓜环斑病毒 RNA沉默 基因转化
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 2210-2215
• 页数: 6页
• 分类号: S432.41
• 字数: 4546字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2015.12.017

摘要

为研究广谱抗环斑病毒(PRSV)海南株系转基因番木瓜育种方案,采集海南番木瓜各主要种植区的PRSV株系,以外壳蛋白(CP)、辅助成分-蛋白酶(HC-Pro)和复制酶(Nib)基因作为靶标基因,通过序列比对和运用Clustalx软件分析,得到干扰基因的保守区域和挑选出海南PRSV典型株系的代表样品.以pUCCRNAi为骨架质粒,利用代表样品的CP、NIb、Hc-Pro基因片断保守序列构建RNAi发夹结构,将发夹结构导入pCAMBIA2300-35S-OCS植物表达载体,构建出抗PRSV植物表达载体pCAMBIA2300-35S-CP-RNAi-OCS、pCAMBIA230035S-Hc-Pro-RNAi-OCS、pCAMBIA2300-35S-NIb-RNAi-OCS.实验将PRSV不同株系保守序列的分析与RNAi的高效抗病设计理念相结合,可用于创造高效、广谱抗PRSV病毒病的新种质.